RNA溶解-長效保存液使用范圍

描述：RNA極易降解。純化的RNA溶解于無RNase的TE或水中，即便是儲存于?20 oC也難免降解。為解決這一問題，可以將RNA沉淀或RNA溶液直接溶解于RNA溶解-長效保存液中，允許4 oC 過夜或?20 oC保存至少2年，保護樣品RNA免于降解。RNA溶解-長效保存液是RNA樣品運輸和中長期保存的最-佳選擇。需要時可用常規乙醇法沉淀回收RNA，或直接吸取儲存于RNA溶解保護液中的高濃度RNA(4 mg/ml)進行RNA電泳、Northern Blot。

儲存：4oC保存 12個月有效

用RNA溶解-長效保存液溶解RNA沉淀：
1   a) 對固體RNA沉淀而言，每0.4-4 mg RNA沉淀加入1 ml RNA溶解-長效保存液，室溫振蕩15-30分鐘溶解沉淀。干燥的RNA沉淀難以溶解，可50 oC加熱15分鐘或4oC溶解過夜。最好先用小體積無RNase的TE或水溶解RNA沉淀，然后按液態RNA操作。
b) 對液態RNA溶液，每0.4-4 mg RNA溶液加入1 ml RNA溶解-長效保存液，混勻。注意混合液中RNA溶解-長效保存液的體積百分比不低于80%。
2. 測定OD值。注意加入相應量的RNA溶解-長效保存液做空白。
3. 將溶解的RNA樣品儲存于?20 oC。

從RNA溶解-長效保存液中沉淀RNA：
1. 估計RNA溶液終體積。加入4倍體積的純乙醇，混勻。如果溶液中RNA含量低于0.25 mg/ml，或者溶液體積過小操作不便，可先加入1/20體積的5 N NaCl混勻，然后再加入4倍體積乙醇。
2. 室溫放置5分鐘。
3. 12,000 rpm 5 min。棄上清。風干，溶解。
4. 重新沉淀的RNA溶解后可用于RT-PCR反應。也可用于任何其他實驗。
直接使用RNA溶解-長效保存液中的RNA：
直接吸取RNA溶解-長效保存液中的RNA，進行普通或甲醛變性電泳和Northern Blot。進行甲醛變性電泳時，最后上樣樣品中的RNA溶解-長效保存液的濃度可高達50%。

注意：
1. 如果RNA用于逆轉錄RT-PCR，不推薦直接使用RNA溶解-長效保存液中的RNA，應該用乙醇沉淀RNA。
2. 在RNA溶解-長效保存液中的RNA的終濃度不應該超過4mg/ml。