細(xì)胞鐵離子檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理

描述：
鐵是人體必需的元素之一，對(duì)人體的新陳代謝和身體健康具有重要作用，血液中鐵的含量不足，就會(huì)造成缺鐵性貧血。鐵存在于人體所有的細(xì)胞內(nèi)，各組織、器官包括各內(nèi)分泌腺都含有鐵。肝臟、脾臟和肺組織內(nèi)含量較為豐富。成人體內(nèi)含鐵3～5克，大部分都以蛋白質(zhì)復(fù)合物形式存在，極少部分以離子的形態(tài)存在。本試劑盒采用亞鐵嗪比色法可以定量細(xì)胞鐵離子，線性范圍5~300uM。產(chǎn)品包括標(biāo)準(zhǔn)品和空白對(duì)照，本試劑盒可進(jìn)行100個(gè)樣品的檢測(cè)。 

原理：
鐵與蛋白結(jié)合成復(fù)合物，在酸性介質(zhì)中鐵從復(fù)合物中解離出來(lái)，再被還原劑還原成二價(jià)鐵，并與亞鐵嗪生成紫紅色化合物，在540-580nm處可比色測(cè)定。

儲(chǔ)存
4℃保存，6個(gè)月有效。
適用范圍：
該試劑盒可用于培養(yǎng)細(xì)胞中鐵離子定量檢測(cè)。
用戶自備：
4.5%高錳酸鉀溶液5ml。

操作步驟：
1. 樣品準(zhǔn)備（以24孔板為例）：
將含鐵元素DMEM培養(yǎng)過(guò)的細(xì)胞用冷的PBS 2ml洗兩遍，將PBS吸棄（若不馬上檢測(cè)可將其凍存于-20℃）。200ul/孔裂解液裂解細(xì)胞，置于搖床裂解2h。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：用試劑盒提供的稀釋用液將3mM 的標(biāo)準(zhǔn)品母液稀釋為：300 uM、150uM、75uM、37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。注意倍比稀釋并設(shè)置0濃度對(duì)照反應(yīng)管。
3. 將緩沖液與4.5%高錳酸鉀溶液按1:1混勻，稱為混液A。